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- Endokrin wirksamer Stoff (2) (remove)
Das Bundesamt für Umwelt definiert Endokrine Disruptoren als ,,Chemikalien oder Mischungen von Chemikalien, die die natürliche biochemische Wirkweise von Hormonen stören und dadurch schädliche Effekte (…) hervorrufen.‘‘ [Umweltbundesamt, 2020]. Zum Schutz von Mensch und Natur ist eine effektive Eliminierung von diesen Substanzen notwendig, was jedoch eine sensitive Detektion voraussetzt. Mit Hilfe von Reporter-Gen-Assays wie z.B. dem A-YES lassen sich estrogenwirksame Substanzen in Wasser nachweisen. Im Zuge der kontinuierlichen Optimierung der Hefezell-Assays der new_diagnostics GmbH sollte in dieser Arbeit durch Integration des alternativen Reporterenzyms Meerrettichperoxidase (HRP) in Hefebiosensoren die Möglichkeit geprüft werden, inwieweit eine Verbesserung der Testsensitivität und/oder die Vereinfachung von Verfahrensabläufen möglich ist. Nach Aufbau dafür notwendiger Hrp-Kassetten bzw. Plasmide konnte gezeigt werden, dass diese erfolgreich in den Hefesystemen d.h. in A. adeninivorans und in S. cerevisiae integriert werden konnten. Für die Bewertung der Funktionalität von hefeproduzierter HRP wurde im Vorfeld eine Analytik etabliert, die die Detektion funktionaler HRP bis zu einer Konzentration von ca. ≥ 0,2 Units/ml ermöglichte.