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In der regenerativen Medizin, insbesondere beim Tissue Engineering, spielt die natürliche extrazelluläre Matrix eine große und immer bedeutsamere Rolle. Ein wichtiger Schritt für die medizinische Anwendung ist die Probenvorbereitung. Um die genaue Zusammensetzung des fertigen Produkts bestimmen zu können, muss eine einheitliche Methode für die Extraktion der Bestandteile zur Verfügung stehen. Ein anderer Teil der Probenvorbereitung ist die Dezellularisierung. Um bei der Anwendung in der regenerativen Medizin Abstoßungsreaktionen zu vermeiden, sollen die Zellen des zur Herstellung des Produkts verwendeten Gewebes nahezu vollständig entfernt werden. In dieser Arbeit wurde eine Methode zur Extraktion der extrazellulären Matrix optimiert und etabliert. Zusätzlich wurden verschiedene Dezellularisierungsansätze für die Gewebe untersucht. Die Ergebnisse zeigen, dass eine Extraktion mit dem GuHCl-Puffer für 24 beziehungsweise 48 h gute Ergebnisse bei der anschließenden Evaluation mittels Massenspektrometrie mit sich bringt. Allerdings ist der Erfolg der Extraktion stark gewebeabhängig. Für die Dezellularisierung hat sich die Anwendung des pH-WechselVerfahrens als wirksam erwiesen. Jedoch konnten mit Hilfe der gewählten Bedingungen die bestehenden Grenzwerte für eine erfolgreiche Dezellularisierung nicht erreicht werden.
Die vorliegende Bachelorarbeit befasst sich mit der Charakterisierung der extrazellulären Matrix, die durch humane Fibroblasten in Form von Cell Sheets in Zellkultur produziert wurde. Die Untersuchungen sollten vergleichend für die Zellen der Zelllinie MRC-5 und Primärzellen adulte und fetale humane dermale Fibroblasten durchgeführt werden. Zur Beurteilung der Matrixausprägung kam das Metabolic Oligosaccharide Engineering zum Einsatz. Zwei Methoden zur Dezellularisierung wurden miteinander verglichen, der Erfolg dieser beurteilt und die zurückbleibende extrazelluläre Matrix betrachtet.
Weitere Analysen zur Untersuchung vor und nach der Dezellularisierung beinhalteten unter anderem Glykosaminoglykan- und Hydroxyprolinbestimmungen, Rasterkraftmikroskopie und Siriusrotfärbung.