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Thermodynamische Charakterisierung von Nukleinsäuren mittels der UV-Vis-Absorptionsspektroskopie
(2023)
In dieser Arbeit wird eine DNA-Haarnadelstruktur mittels UV-Vis-Spektroskopie untersucht. Dabei wird die dekadische Extinktion in Abhängigkeit der Temperatur sowie dessen Probenumgebung (Puffer, pH-Wert, monovalenter Kationenkonzentration) gemessen. Mittels anschließender Datenanalyse in Python werden thermodynamische Parameter wie Schmelztemperatur, molare Enthalpie sowie molare Entropie bestimmt und bezüglich der Probenumgebungen verglichen
In dieser Arbeit wird ein DNA-Einzelstrang mittels fluoreszenzspektroskopischer Untersuchungen charakterisiert. Die DNA ist mit zwei Fluorophoren markiert, damit die Charakterisierung mittels FRET durchgeführt werden kann. Durch Zugabe von monovalenten Metallionen K(I) und Na(I) wird der Faltungszustand der DNA beeinflusst. Die Messungen werden bei verschiedenen Bedingungen durchgeführt (Metallionenkonzentration, Metallion, Temperatur, Puffer und pH-Wert). Durch die Berechnung des relativen Anteils der Akzeptoremission kann FRET bestimmt werden und daraus auf den Abstand der Farbstoff am Molekül der DNA geschlossen werden.